分子生物学试题
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求助：分子生物学考博试题：在大肠杆菌中表达动物激素的基因可能遇到的问题及解决方法
答：要使动物中编码激素的基因在大肠杆菌中表达，通常遇到的分生问题有：
(1)细菌的RNA聚合酶不能识别真核生物的启动子。
(2)大多数真核基因有内含子，物学这些内含子在转录后从前体mRNA中被切除而形成成熟mRNA。试题细菌细胞没有这样的分生机制来去除内含子。
(3)有些真核生物的物学蛋白质是通过前体分子加工而来的，例如胰岛素就是试题通过加工去除 前体分子内部的33个氨基酸残基而来，剩下的分生两段肽链分别形成胰岛素的a、b链。物学
(4)产生的试题真核生物的蛋白质产物可以被细菌的蛋白酶所识别和降解。
针对上述可能出现的问题，建议在克隆的过程中采取以下措施：
①应将激素的编码序列置于含有核糖体结合位点和起始密码子ATG的细菌强启动子的附近(含有这种序列的载体称表达载体)。
②可以以激素的mRNA为模板用反转录酶合成激素的基因。这种DNA不含内含子可插入到载体中进行克隆。此外，如果蛋白质序列短则可通过化学合成得到该基因。合成的基因应含起始密码ATG、通过该激素蛋白的氨基酸序列推测而来的编码序列，以及1~2个终止密码：
ATG——————编码序列————————TGA TAG
现在，这个合成基因可被插入载体中。
③有时加工过程可以在离体条件下进行。如果加工有困难，可以用合成基因，从而免除加工过程。
④选用合适的突变型宿主从而防止蛋白酶水解。如果用酵母作为宿主上述许多问题都可以较容易地解决，尤其是现在有既能在大肠杆菌中又能在酵母中复制的穿梭质粒载体。
说明：1)ATG,TAG和TGA是对应mRNA中的转录起始信号AUG和终止信号UAG,UGA的DNA序列。
2)克隆生长素释放抑制因子基因时采用化学合成基因的方法。生长索释放抑制因子是一种由下丘脑分泌的激素，长14个氨基酸残基，因此人工合成的基因，包括在宿主菌中表达所需的转录的起始和终止信号，仅51bp长。
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分子生物学试题（一）
一、名词解释：（每题3分，共30分）
1、物理图谱
指应用限制性核酸内切酶，将DNA分子降解成大小不同的片段，再将这些片段排列成一定顺序的图谱。
2、SSB
可与DNA单链相结合防止核酸酶对DNA的水解及防止DNA单链重新构成双链并使前端DNA双螺旋的稳定性降低、易于解开的蛋白质。
3、断裂基因
是指真核生物的基因是由编码序列和非编码序列构成的，编码序列被非编码序列分割开来。
4、同源重组
、是指减数分裂过程中同源染色体间的遗传物质的交换。重组对之间具有同源性。
5、trans-acting element
、调节蛋白通过扩散结合于细胞内的多个靶位点，发生突变后将同时影响不同染色体上等位基因的表达，这种作用为反式作用，这些调节蛋白即称为反式作用因子。
6、反义RNA
为载体，即基因载体或称克隆载体、，是在基因工程中为“携带”感兴趣的外源DNA、实现外源DNA的无性繁殖或表达有意义的蛋白质所采用的一些DNA分子，具有自我复制和表达功能。
7、母源影响基因
、是指果蝇在个体发育中，其身体极性的分化受到来源于母本的抚育细胞、滤泡细胞、和脂肪体细胞的基因的影响，这些被输入到卵母细胞的基因称为母源影响基因，对卵子的发育有重大影响。
8、CpG岛
是指在某些基因上游的转录调控区及其附近，存在着成串的CpG二核苷酸序列，长度可达1—2kb,这段序列往往被称为CpG岛。其上的大部分CpG不被甲基化。
9、热休克蛋白
是指生物体在适宜温度范围以上，经热诱导合成的一系列蛋白，它们参与靶蛋白的活性和功能的调节。对生物体具有保护作用并在细胞的正常生长和发育中起重要作用。
10、功能基因组学
是依附于对DNA序列的了解，应用基因组学的知识和工具去了解影响发育和整个生物体的特定序列表达谱。
二、是非题（对的打“√”，错的打“Ⅹ”；每题1分，共10分）
1、编码区以外的突变不会导致细胞或生物体表型改变。 （ ）
2、真核基因的外显子是成熟的mRNA或蛋白质中的存在序列，内含子是初级转录产物hnRNA加工成熟时被切除的序列。外显子是有功能的，内含子是无功能的。 （ ）
3、DNA复制的半不连续模型是由复制时两条DNA单链分别复制得来的。（ ）
4、锌指（Zn finger）是转录因子转录激活功能区的一种结构模式。 （ ）
5、IS元件整合到靶位点时会导致靶位点产生序列重复。 （ ）
6、增强子具有启动子的功能。 （ ）
7、假基因通常与它们相似的基因位于相同的染色体上。 （ ）
8、C0t1/2与基因组大小相关，与基因组复杂性也相关。 （ ）
9、大肠杆菌中SOS反应的最主要作用是通过在原始DNA损伤区附近导入补偿突变来提高细胞存活率。 （ ）
10、编码区以外的突变不会导致细胞或生物体表型改变。 （ ）
三、选择题（每题1分，共20分）
1、 大肠杆菌DNA聚合酶I与---------无关。 （ ）
A. DNA复制 B. DNA 修复
C. 基因重组 D. 基因突变
2、卫星DNA是一类： （）
A. 高度重复的DNA序列 B.中度重复的DNA序列
C. GC丰富的DNA序列 D.不编码的RNA序列
3、DNA连接酶催化的化学反应 （）
A、可以填补引物遗留下的空隙 B、水解引物
C、向3`-OH末端加入dNTP
D、生成磷酸二指键 E、生成氢键
4、下列序列中的哪一个可能是mRNA：5`--AUAGGCGAU—3`的对应基因序列（）
A. 3`--TATCCGCTA—5` B. 5`--ATCGCCTAT—3`
C. 5`-- TATCCGCTA—3` D. 3`--UAUCCGCUA—5`
5、用实验证实DNA半保留复制的学者是（）
A.Watson和Crick B.Kornberg
C.Sanger D.Nierenberg
E.Meselson和Stahl
6、点突变引起的后果是（）
A、DNA降解 B、DNA复制停顿
C、转录终止 D、氨基酸读码可改变
E、氨基酸缺失
7、tRNA和5s rRNA是由真核生物哪种酶催化转录产生的？ （）
A、RNA聚合酶I B、逆转录酶
C.RNA聚合酶 D.RNA聚合酶全酶
E.RNA聚合酶Ⅲ
8、识别转录起始点的是 （）
A、ρ因子 B、核心酶
C、 RNA聚合酶的α亚基 D、σ因子
E、dna B蛋白
9、核酶（ribozyme） （）
A.是有催化作用的蛋白质 B.以NAD+为辅酶
C.有茎环结构和随后的寡聚U D.能催化RNA的自我剪接
E.是由snRNA和蛋白质组成的
10、构成最简单的启动子的常见功能组件是 （）
A. TATA盒 B. CAAT盒 C. GC盒 D. 上游调控序列（UAS）
E. 以上都不是
11、原核生物和真核生物都有的rRNA是 （）
A. 18s-rRNA B. 5s-rRNA C. 5.8s-rRNA D.28s-rRNA E. 16s-rRNA
12、真核生物的TATA盒是 （）
A、DNA合成的起始位点
B、RNA聚合酶与DNA模板稳定结合处
C、RNA聚合酶的活性中心
D、翻译起始点
E、转录起始点
13、目前认为基因表达调控的主要环节是（）
A. 基因活化 B. 转录起始 C. 转录后加工 D. 翻译起始 E. 翻译后加工
14、cAMP与CAP结合、CAP介导正性调节发生在 （）
A. 有葡萄糖及cAMP较高时 B. 有葡萄糖及cAMP较低时
C. 没有葡萄糖及cAMP较高时 D. 没有葡萄糖及cAMP较低时
E. 葡萄糖及cAMP浓度极高时
15、顺式作用元件是指 （）
A. 基因的5`侧翼序列 B. 基因的3`侧翼序列 C. 基因的5`、3`侧翼序列
D. 基因5`、3`侧翼序列以外的序列 E. 具有转录调节功能的特异DNA序列
16、核糖体是（）
A. tRNA的三级结构形式 B. 参与转录终止，因为翻译紧接着转录之后
C. 有转运氨基酸的作用 D. 遗传密码的携带者 E. 由rRNA和蛋白质构成
17、在重组DNA技术领域所说的分子克隆是指（）
A. 建立单克隆抗体 B. 建立多克隆抗体 C. 构件重组DNA分子
D. 无性繁殖DNA E.有性繁殖DNA
18、可识别并切割特异DNA序列的称（）
A. 限制性核酸外切酶 B. 限制性核酸内切酶 C.非限制性核酸外切酶
D. 非限制性核酸内切酶 E. DNA酶
19、有关DNA序列自动化测定的不正确叙述是（）
A. 用荧光代替了同位素标记 B. 激光扫描分析代替人工读序
C. 基本原理与手工测序相同 D. 不再需要引物
E. 需要与手工序列分析相同的模板
20、哪些有关免疫球蛋白基因重排的叙述是正确的？ （）
A. 所有物种中V基因的数目是相同的 B.J是恒定区的一部分
C. 各部分连接时，将产生缺失和重排
D. 当一个等位基因中发生有意义的重排时，另一个等位基因也发生重排
四、简答题：
1、简述转座所引起的遗传学效应。（4分）
2、简述切除修复DNA的过程。（4分）
3、简述遗传密码（三联体密码）的兼并性（degeneracy）和摆动假设（wobble hypothesis）。（6分）
4、什么叫原癌基因？原癌基因是通过什么途径活化的？（8分）
5、简述人类基因组计划成果体现的四个图谱。（8分）
五、分析问答题：
1、假定你从一新发现的病毒中提取了核酸。请用最简单的方法确定：
（1）它是DNA还是RNA？ （2）它是单链还是双链？(4分)
2、Nirenberg等人是怎样利用核糖体结合技术进行遗传密码的破译的？（6分）
参考答案：
、二、是非题：
1、错 2、错 3、错 4、错 5、对 6、对 7、错8、对 9、错10、错
三、选择题：
1、D 2、A 3、D 4、A 5、E 6、D 7、E 8、D 9、D 10、A 11、B
12、B 13、B 14、C 15、D 16、E 17、D 18、B 19、D 20、C
四、问答题：
1、①转座引起插入突变②转座产生新的基因③转座产生染色体畸变④转座引起生物进化
2、①特异核酸内切酶识别并结合于损伤部位，在DNA的5`端切断临近损伤部位的磷酸二酯键②在5`外切核酸酶作用下切除损伤部位。③以另一条完整的DNA链为模板，由DNA PolI在切口处催化局部的小段DNA的合成④DNA连接酶将所合成的新DNA片段与原来的DNA链连接起来，从而完成修复过程。
3、遗传密码普遍存在与生物界中，由一种以上的密码子编码同一个氨基酸的现象称为遗传密码的兼并性。对应于同一氨基酸的密码子称为同一密码子。而遗传密码的摆动假设是由Crick于1966年为解释反密码子中某些稀有碱基的配对和许多氨基酸有两个以上的密码子的问题而提出的。它是指密码子与反密码子的配对中，前两对严格遵守碱基配对原则，第三对碱基有一定的自由度，可以“摆动”，因而使某些tRNA可以识别1个以上的密码子。
4、是细胞内存在的一些对控制细胞生长和分化有关的基因，与病毒癌基因有广泛的同源性。若其发生突变，则可致癌。原癌基因活化途径：①点突变②LTR插入③基因重排④基因缺失⑤基因扩增。
5、①遗传图，是指基因或DNA标志在染色体上的相对位置与遗传距离，常用基因或DNA片段在染色体交换过程中的分离频率—厘摩（cm）表示。所用遗传标记为RFLP、重复序列以及分散于基因组中的单个碱基的差异（单个核苷酸的多态性）。②物理图，是指以已知核苷酸序列的DNA片段为“路标”，以碱基对作为基本测量单位（图距）的基因组图。用STS技术绘制基因组物理图是目前为止最有效的方法。③转录图，也称cDNA图或表达序列标签图（EST），是用所得到的cDNA或EST筛选全长的转录本，并将该基因准确地定位于基因组上。④人类基因组的核苷酸序列图，是分子水平上最高层次的、最详尽的物理图。测定30亿个核苷酸组成的全序列，目前已基本完成。
因此，人类基因组计划进入后基因组时代。
五、分析问答题：
1、①检测其有无U和T，若有U无T则为RNA，若有T无U则为DNA。②测算四种碱基的百分含量，若G与C的含量，A与T或U的含量相等则为双链，否则为单链。
2、他们以人工合成的三核苷酸为模板，在含核糖体、AA-tRNA的适当离子强度的反应液中保温，然后使反应液通过硝酸纤维素滤膜，由于三核苷酸模板可与相对应的AA-tRNA结合于核糖体上，因体积大于滤膜而被滞留于膜上，游离的AA-tRNA可透过滤膜，这样就可将结合到核糖体上的AA-tRNA与未结合的AA-tRNA分开。用20种AA-tRNA作20组同样的实验，每组都含20种AA-tRNA和一种用C14标记的氨基酸，经分析滞留在膜上的AA-tRNA和氨基酸，即可推知氨基酸的密码子。
分子生物学试题： 已知原核生物的A、B、C三个基因的序列，设计实验证明这三个基因在同一个操纵子上，
咳，是这样，原核生物没有内含子，不会有扩增上面的影响，比如引物结合的位置不对引起的后续这种。这个问题其实没那么复杂，假定这个基因序列是ABC，如果设计了A的引物，扩增出来的产物就主要是含有ABC的大片段；如果是设计B的引物，就有BC的片段；如果是C的引物，就只是C的片段，在大小上就能分离出来。你用marker估算一下三种片段的大小，M（abc）-M（bc）=M（a），同样的M（bc）-M（c）=M（b），你再与自己已知的大小对照一下。
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(责任编辑：皮革)
